【摘要】背景與目的：檢測(cè)小鼠光氣染毒后肺部氧化指標(biāo)的改變及不同濃度氨水對(duì)其指標(biāo)的影響，以探討對(duì)光氣肺損傷現(xiàn)場(chǎng)防護(hù)的新方法。材料與方法：動(dòng)物按體重隨機(jī)分為5組，每組10只，雌雄各半，分別為陰性對(duì)照組，陽(yáng)性對(duì)照組，低劑量(10ml/L)氨水組，中劑量(20ml/L)氨水組及高劑量(40ml/L)氨水組。染毒柜內(nèi)光氣濃度23.8mg/m3，染毒5min。其中氨水組染毒柜內(nèi)同時(shí)分別放置10ml/L、20ml/L和40ml/L氨水。染毒后3h，將動(dòng)物斷頭處死，采血并取肺臟。熒光法分別檢測(cè)肺臟的丙二醛(Malondialdehyde,MDA)、還原性谷胱甘肽(Reducedglutathione,GSH)和氧化性谷胱甘肽(Oxidizedglutathione,GSSG)以及全血谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(Glutathioneperoxidase,GSH-Px)，同時(shí)進(jìn)行全血分析。結(jié)果：陰性對(duì)照組與陽(yáng)性對(duì)照組各項(xiàng)指標(biāo)比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；且不同劑量氨水組肺臟的MDA、GSSG含量均有減少，而肺臟GSH、全血GSH-Px差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。此外，各組WBC與陽(yáng)性對(duì)照組比較有顯著下降，RBC、HGB、PLT各組相似。結(jié)論：光氣中毒后肺部有氧化損傷，暴露于光氣時(shí)給予揮發(fā)性氨水進(jìn)行現(xiàn)場(chǎng)消毒，可以減輕這種氧化損傷。
【關(guān)鍵詞】光氣；氨水；氧化損傷
中圖分類號(hào)：R733.1文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A文章編號(hào)：1004－616X(2005)05－0269－03
光氣既是重要的化工原料，又可作為軍用毒劑，其對(duì)人體的主要毒害作用部位在肺部，其作用特點(diǎn)是接觸當(dāng)時(shí)刺激癥狀輕，經(jīng)過(guò)一定的潛伏期后才出現(xiàn)嚴(yán)重病變，極易發(fā)生肺水腫甚至急性呼吸窘迫綜合癥[1]。急性光氣中毒是常見(jiàn)的職業(yè)病，常發(fā)生于生產(chǎn)或使用過(guò)程中的意外事故，而個(gè)人未及時(shí)防護(hù)所致。由于目前還沒(méi)有治療光氣中毒的特效藥，一旦發(fā)生肺水腫，治療十分困難[2]，因此對(duì)于光氣的現(xiàn)場(chǎng)防護(hù)十分必要，以使早期癥狀得以糾正。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)光氣染毒同時(shí)，給予揮發(fā)性堿性中和液進(jìn)行中和消毒，觀察各種氧化指標(biāo)的變化，進(jìn)一步探討急性光氣中毒的早期防護(hù)手段。
1材料與方法
1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及儀器試劑二級(jí)昆明小鼠50只，雌雄各半，體重(20.5±2.4)g，由第四軍醫(yī)大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。固體三光氣購(gòu)于潤(rùn)發(fā)化工有限公司；環(huán)己烷，N,N－二甲基甲酰胺，氨水均為分析純，購(gòu)于西安化學(xué)試劑廠；硫代巴比妥酸(Thiobarbiturate,TBA)購(gòu)于Emerck公司；還原型谷胱甘肽(Reducedglutathione，GSH)、氧化型谷胱甘肽(Oxidizedglutathione,GSSG)購(gòu)于上海藥品采購(gòu)站；鄰苯二醛(O-phenaldehyde,OPT)、N-乙基馬來(lái)酰亞胺(N-ethylmaleimide,NEM)購(gòu)于華美公司。氣體染毒柜由本教研室提供；Portasens氣體檢測(cè)儀產(chǎn)自荷蘭AnalyticalTechnology公司；970CRT熒光分光光度計(jì)由上海三科儀器有限公司生產(chǎn)；D40-1型電動(dòng)勻漿器產(chǎn)自浙江杭州儀表電機(jī)廠。
1.2中毒及處理方法動(dòng)物按體重隨機(jī)分為5組，每組10只，雌雄各半，分別為陰性對(duì)照組，陽(yáng)性對(duì)照組，低劑量(10ml/L)氨水組，中劑量(20ml/L)氨水組及高劑量(40ml/L)氨水組。將各組動(dòng)物置于染毒柜內(nèi)染毒5min，用氣體泄漏檢測(cè)儀側(cè)得光氣濃度為23.8mg/m3。光氣由固體三光氣溶于環(huán)己烷，N,N－二甲基甲酰胺滴定產(chǎn)生。其中實(shí)驗(yàn)組動(dòng)物染毒柜內(nèi)分別放置10ml/L、20ml/L、40ml/L氨水，將動(dòng)物置于放有氨水的容器之上，共同推入染毒柜內(nèi)，放置1min使氨水得以揮發(fā)，然后進(jìn)行染毒。
1.3檢測(cè)指標(biāo)和方法染毒后3h，將所有動(dòng)物斷頭處死，采血并取肺臟。將肺臟稱重，按1∶5加入生理鹽水用電動(dòng)勻漿器冰浴上制備為勻漿，3000r/min離心10min，取上清液待測(cè)。采用熒光分光光度計(jì)法[3，4]，分別測(cè)定了肺組織的丙二醛(Malondialdehyde,MDA)、GSH、GSSG及全血的谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(Glutathionperoxidase,GSH-Px)。考馬斯亮藍(lán)法[5]測(cè)定蛋白。并進(jìn)行全血分析。
1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法結(jié)果采用平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(－±s)表示，用SPSS11.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行非參Kruskal-WallisH及Mann-WhitneyU檢驗(yàn)。
2結(jié)果
2.1小鼠肺GSH、GSSG、MDA及全血GSH-Px的測(cè)定結(jié)果結(jié)果見(jiàn)表1。陰性對(duì)照組與陽(yáng)性對(duì)照組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；且不同劑量氨水組肺臟的MDA、GSSG含量均有顯著增加(P<0.05)，而GSH、全血GSH-Px差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
2.2全血分析不同劑量組WBC與陽(yáng)性對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，說(shuō)明可減輕炎癥反應(yīng)；RBC、HGB、PLT各組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，(表2)。
3討論
窒息性氣體作用迅速，危及范圍大，帶來(lái)社會(huì)不穩(wěn)定因素。它的發(fā)生往往是突發(fā)的和難以預(yù)料的。急性光氣吸入中毒的主要病理改變是肺水腫，潛伏期是肺水腫的發(fā)生與發(fā)展階段，中毒者吸人光氣后均經(jīng)一定的潛伏期(1.5h～3d)才出現(xiàn)呼吸系統(tǒng)損害的臨床表現(xiàn)。潛伏期的長(zhǎng)短與病情嚴(yán)重程度有關(guān)[6]，潛伏期越短，病情越重。如能及時(shí)給予適當(dāng)?shù)闹委煟勺钄嗷驕p輕肺水腫的發(fā)生與發(fā)展。待肺水腫發(fā)生后再采取措施，治療就甚為困難。故提出現(xiàn)場(chǎng)防護(hù)是十分必要的，本實(shí)驗(yàn)為此提供了新的思路和依據(jù)。
有研究證明光氣是一種氧化性氣體，光氣中毒后，機(jī)體的總抗氧化力(TAO)顯著下降，機(jī)體MDA、GSSG顯著增加，GSH顯著減少，且與中毒劑量有明顯的劑量和效應(yīng)關(guān)系[7]。降低氧化指標(biāo)已成為有效的治療措施之一。光氣在水中不易溶解，這是它比其它氣體更易引起中毒的原因，而它在堿性環(huán)境下溶解度會(huì)增加[6]；光氣本身又是一種酸性氣體，與堿作用后失去毒性，因此本實(shí)驗(yàn)考慮運(yùn)用堿性液體防治中毒。結(jié)果證明光氣染毒時(shí)，給予吸入氨氣可中和光氣，減弱毒性，使體內(nèi)的氧化指標(biāo)有明顯的降低。這提示我們接觸光氣時(shí)，吸入揮發(fā)性堿性中和液一方面可以與光氣酸堿中和，降低其氧化性對(duì)肺臟所造成的損傷，另一方面也可以對(duì)光氣中毒后的ARDS引起的酸中毒起治療作用。
參考文獻(xiàn)：
[1]SciutoAM.Assessmentofearlyacutelunginjuryinrodentsexposedtophosgene[J].ArchToxicol,1998,72(5):283－288.
[2]BorakJ,DillerWF.Phosgeneexposure:Mechanismsofinjuryandtreatmentstrategies[J].JOccupEnvironMed,2001,43(2):110－119.
[3]QINXJ,HEW,HAICX,etal.Effectofantioxidantscompoundonoxidativeinjuryinlocalradiatedratswithtumor[J].JFourthMilMedUniv,2002,23:850－852.
[4]龐戰(zhàn)軍,周玫,陳瑗.自由基醫(yī)學(xué)研究方法[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,2000.
[5]FENGAJ,HAICX,JIANGN,etal.ProphylacticofvitaminAandvitaminEagainstfreeradicalinjuryproducedbysomaninrats[J].ChinJPharmacolToxicol,2002,16:53－55.
[6]徐明之,尉康嶺,倪為民,等.急性光氣中毒研究進(jìn)展[J].中華勞動(dòng)衛(wèi)生職業(yè)病雜志,1998,16(4):254－255.
[7]SciutoAM,StricklandPT,KennedynTP,etal.IntrachealadministrationofDBMPattenuatesedemaformationinphosgene-inducedacutelunginjury[J].JApplPhysiol,1996,80(1):149－157.
[8]羅成基,歐陽(yáng)子倩,俞安順.核、化學(xué)武器損傷防治學(xué)[M].北京:人民軍醫(yī)出版社,1994.166－173.